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艾滋病检测国际通用标准:金标和酶标检测方法

作者:未知     来源:未知    发布时间:2012年04月14日    点击数:

目前常用的艾滋病检测方法,是快速法和酶标法,快速法一般用的都是金标法,酶标也就是我们常说的酶联法。

1、金标法,又叫“胶体金法”,金标法是国际上较为先进的灵敏,特异,快速,简便,准确率高的体外诊断方法。测定结果仅凭特制的检验盒在短时间内内即可获得。金标法(试纸),抽血后滴在试纸上,用20分钟的时间观察该试纸有无颜色变化。如果有颜色变化,则初检阳。

2、酶标法,又叫“酶联免疫法”,灭活了的抗原与被检者血液的血清混在一起,有颜色变化的,则初检阳。无色或颜色变化微弱的,则为阴。不管有无颜色变化,都要用酶标仪检测。

酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。注意:第一次检测为阳性的话,一定要去确认实验室再做一次,勇敢的去面对,也许结果就不一样了。

酶标现在分四代:

第一代试剂 1985 ELISA 间接法 培养纯化抗原 51 ~ 55 天

第二代试剂 1990 ELISA 间接法 重组表达抗原 42 ~ 45 天

第三代试剂 1994 ELISA 双抗原夹心法 重组表达抗原 22 天

使用合成多肽HIV抗原(少数用重组抗原),应用双抗原(或双抗体)夹心法原理检测HIV抗体(或抗原)。由于标记HIV抗原可同时检测血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体,此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。

第四代试剂 1998 ELISA 夹心法 检测抗原和抗体 16 天

此类试剂在第三代试剂盒基础上,将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原一起包被固相载体,可同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。

很多艾滋病病友问,现在使用的是几代试剂,现在大多是3代,有用到4代的(二代早就停产了,现在没有二代试剂)。金标不分代,但等同于酶标三代。

其实很多人侧重于酶标,其实我个人觉得,只要是国家允许使用的方法,都是一样的,过了窗口期,都可以查出来的。

您可以在自己家里自己做检测,方法很简单,就是用试纸做检测,先滴两滴血在试纸上,然后再滴一滴稀释液放在试纸上,等待20分钟左右,如果试纸上出现一条红色的线,说明是阴性,如果是两条红线的话,就是为阳性。
(以上这点标红,主要是因为引用某些专业论坛贴子里不乏有渲染自购试纸效果等同于医院检测的营销性话语,张老师认为在同等条件下尽量选择去医院和权威的部门,毕竟人心理都有比较情绪,也会在检测后有更多的敏感意识。特别当有人怀疑自己自测的行为不科学时,又会陷入复恐的境地。所以认为为了避免有可能的恐惧因素,我们尽量在第一次就选择最权威的地方进行检测。如果实在没有能力或者客观原因不愿意去医院检测的,可以选择正确渠道进行购置,但是前提必须有一个,就是对方无偿为购置试纸的恐友提供个性化一对一专业的心理干预和艾滋病知识的普及,否则单单出售试纸也仅仅充其量不过是一种盈利行为,没有丝毫公德心及公益性,也并不是把试纸的出售建立在让恐友脱恐的基础上,所以无论其是否是医生,张老师想自己更会把他定义成试纸商。)

 
艾滋病检测注意事项

确定一个人是否感染了艾滋病病毒,目前通常的检查办法是到当地的卫生机构进行血液的艾滋病病毒抗体检测。如抗体检测呈阳性反应,表明这个人已经被艾滋病病毒感染。

由于感染艾滋病病毒2-4周后(一般不超过3个月)才能从血液中检测出艾滋病病毒抗体,所以怀疑自己可能感染了病毒,应尽早去做检测。

检测的结果若为阳性,应在3个月后再去复查。


张老师笔记:

       如果大家在各种恐友和恐怖分子聚集的论坛看到诸如在医院检测一次就被确定为阳的话语,大家记住这个是错误的。一般对 “阳”进行确诊的,只有疾病控制中心,医院仅仅作为艾滋病检测的哨点,不具有判断性质。如果说一般被查出可能携带艾滋病病毒的相关血液标准时,医院仅仅会出具不确诊的单子,并要求其进一步复查,一般经过两到三次的检测,才会有是市区一级的疾控中心确诊,并上报上级部门。大家需要明白的是知识的积累越深厚,对外界错误的言论和蛊惑人心的语言就越有自我的判断力。另外对于所谓的检测周期做一个说明,按照其培养抗原所能检测的时间来说,一代一般能确保无问题的时间段,在于六个月后,二代在于三个月后,三代在于六周后,而四代在于四周后。也就是为什么拥有了现在的“四周论”,“六周论”以及国家根据二代试剂标准所推行的法制法规中检测的时期为三个月。其实随着日新月异的科技发展,三个月早已成为过去时代的标志。至于现在各自怎么看待窗口期,还是那句话,仁者见仁智者见智。只是张老师想提醒大家,基本上目前的试剂中在四周的酶联检测为阴后,并没有转阳的例子,除非那并不是他高危的时期或者在检测期中依旧复高等。

 

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